گونهی باسیلوس، در رنگآمیزی شیفر فالتون اندوسپورها سبز رنگ دیده میشوند.
شامل جنسهای باسیلوس، لیستریا، کورینه باکتریوم، لاکتو باسیلوس، رودوکوکوس، اریزیپلوتریکس، گاردنرلا، نوکاردیا و اکتینومایسس
آزمایشات معمول: بررسی انواع همولیز روی آگار خون دار
رشد روی آگار زرده تخم مرغ
هیدرولیز ژلاتین
مقدمه :
جنسهای معمول باسیلهای گرم مثبت شامل باسیلوس، کورینه باکتریوم، اریزیپلوتریکس، گاردنرلا (گرم متغیر)، لاکتوباسیلوس و لیستریا میشوند. سویههایی که از نظر بالینی اهمیت کمتری دارند در جنسهای آرکانو باکتریوم، اورسکوویا و رودو کوکوس قرار دارند. نوکاردیا و استرپتومایسس که باسیلهای گرم مثبت رشتهای شاخدار هستند نیز در این گروه قرار میگیرند.
جنسهای این گروه بر اساس مورفولوژی میکروسکوپی و واکنش کاتالاز از یکدیگر تشخیص داده میشوند. گونههای باسیلوس، کورینه باکتریوم، لیستریا، اورسکویا و رودوکوکوس کاتالاز مثبت هستند. فقط جنس باسیلوس اسپور تشکیل میدهد.
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
گونهی باسیلوس، در رنگآمیزی شیفر فالتون اندوسپورها سبز رنگ دیده میشوند.
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
گونهی باسیلوس در رنگآمیزی اسپور
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
سویهی باسیلوس سرئوس جدا شده از خاک آلوده به گازولین، کشت یافته بر روی آگار خون دار ۵ درصد تهیه شده از خون گوسفند. این عکس یک هفته پس از کشت گرفته شده، اسپورها معمولاً پس از سه روز ظاهر میشوند. باسیلوس سرئوس میتواند طی یک دوره انکوباسیون کوتاه (متوسط ۲ ساعت) باعث مسمومیت غذای...
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
اندوسپور در گونهی باسیلوس، تصویر گرفته شده از میکروسکوپ فازکنتراست.
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
اندوسپورهای باسیلوس آنتراسیس، تصویر گرفته شده از میکروسکوپ فازکنتراست. نقطههای نور ناشی از دهیدراته شدن ارگانیسم و خاصیت انکساری اندوسپورها میباشد.
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
بتا همولیز با هاله دوگانه در سویهی باسیلوس سرئوس کشت یافته بر روی آگار خوندار ۵ درصد تهیه شده از خون گوسفند.
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
بتا همولیز با هاله دوگانه در گونهی باسیلوس کشت یافته بر روی آگار خوندار 5% تهیه شده از خون گوسفند.
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
کلنیهای باسیلوس آنتراسیس (B.anthracis) بر روی آگار خوندار ۵ درصد تهیه شده از خون گوسفند، کلنیهای خاکستری رنگ با حاشیه نامنظم و غیر همولیتیک
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
کلنیهای باسیلوس آنتراسیس کشت یافته بر روی محیط کشت کلمبیا آگار، کلنیها با حاشیههای سست و نامنظم
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
کلنی باسیلوس سوبتیلیس، (B.subtilis) (PabrB-gfp) کلنیهای با حاشیههای سست و نامنظم. (بزرگنمایی کم)
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
باسیلوس تورینجنسیس (B.thuringiensis) کشت یافته بر روی آگار خوندار ۵ درصد تهیه شده از خون گوسفند، کلنی با حاشیه نامنظم ضعیف
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
دو کلنی از باسیلوس لیکنی فورمیس (B.licheniformis) کشت یافته بر روی آگار خوندار ۵ درصد تهیه شده از خون گوسفند، کلنیهای با حاشیه نامنظم و قطعه قطعه
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
تعداد زیادی از گونههای باسیلوس آنزیم پروتئولیتیکی را ترشح میکنند که میتوانند ژلاتین را هیدرولیز کنند. در روشی که مشاهده میشود، فیلم رادیولوژی که قبلاً در معرض اشعه X قرار گرفته است به عنوان سوبسترا برای تعیین فعالیت ژلاتیناز به کار میرود. تجزیه ژلاتین موجب تخریب پ...
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
بیشتر سویههای لیستریا مونوسیتوژنس میتوانند کمتر از دو ساعت اسکولین را هیدرولیز کنند. در لوله سمت چپ یک واکنش مثبت از تجزیه اسکولین مشاهده میشود و در عکس سمت راست واکنش مثبت از تجزیه هیپورات نشان داده شده است.
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
کلنیهای کورینه باکتریوم جیکیوم (C.jeikeium) بر روی آگار خوندار ۵ درصد تهیه شده از خون گوسفند، پس از یک شب انکوباسیون در CO2 پنج تا ده درصد. این سویهها میتوانند سپسیس کشنده ایجاد نمایند.
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
کلنیهای کورینه باکتریوم دیفتریه (C.diphtheriae) بر روی محیط کشت تینسدال آگار، این محیط انتخابی، در کنار آگار خوندار برای کشت کورینه باکتریوم دیفتریه و جدا کردن آن از سایر کورینه باکتریومها به کار میرود. در این محیط که پتاسیم تلوریت آگار نیز نام دارد، کلنی کورینه باکتریوم دیفت...
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
رنگآمیزی لوفلر متیلن بلو، گرانولهای متاکروماتیک کورینه باکتریوم دیفتریه در هنگام رنگآمیزی با این روش یا رنگآمیزی نایسر مشاهده میشوند. بهترین رنگآمیزی هنگامی است که از کلنیهای کشت یافته در محیط شیبدار لوفلر انجام شود. دانههای متاکروماتیک در این رن...
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
گونههای لاکتوباسیلوس (Lactobacillus spp) در رنگآمیزی گرم از ترشحات واژن،گونههای لاکتوباسیلوس باسیلهای بلند و بدون اسپورهستند، آنها ممکن است به صورت کوکو باسیلهای کوتاه ظاهر شوند. هنگامی که این باکتریها از نظر میکروسکوپی به صورت کوکو باسیل ظاهر میشوند م...
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
لاکتو باسیلوس پلانتروم (L.plantarum) کشت یافته بر روی لاکتو باسیلوس آگار، کلنیهای محدب با حاشیه صاف
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
کلنی گونهای از لاکتوباسیلوس بر روی آگار خوندار ۵ درصد تهیه شده از خون گوسفند، کلنی این باکتری مشابه استرپتوکوکوسهای ویریدنس و اریزیپلوتریکس همولیز آلفا ایجاد میکند. برای تشخیص این باکتریها از یکدیگر آگاهی از منبع نمونه ضروری است. به علت این که دو باکتری در اغلب م...
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
کلنیهای اریزیپلوتریکس روزیوپاتیه (E.rhusiopathiae) بر روی آگار خوندار ۵ درصد تهیه شده از خون گوسفند، کلنیها نرم و کوچک، با قطری کمتر از 1 میلیمتر و شفاف هستند. کلنیها با همولیز آلفا سبز رنگ مشخص میشوند.
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
اریزیپلوتریکس روزیوپاتیه بر روی TSI ، از مشخصات این باکتری تولید H2S در طول خط تلقیح بر روی TSI شیبدار است که مدت ۴۸ ساعت در دمای ۳۵ºC انکوبه شده باشد.
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
گاردنرلا واژینالیس (G.vaginalis) در رنگآمیزی گرم (بزرگ نمایی۱۲۵۰ برابر)، این باکتری میلهای شکل گرم مثبت و برخی مواقع گرم متغیر میباشد که میتواند از دستگاه تناسلی انسان جدا شود.
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
کلنیهای گاردنرلا واژینالیس بر روی شکلات آگار، کلنیهای نازک نقطهای پس از ۲۴ ساعت انکوباسیون روی شکلات آگار تشکیل میشود. جداسازی این ارگانیسم نشانهی اختصاصی واژینوس باکتریال نمیباشد. زیرا گاردنرلا واژینالیس در ۵۰ درصد زنان بدون علامت کلونیزه میشود. هیدرولیز هی...
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
آزمایش هیدرولیز هیپورات، گاردنرلاواژینالیس قادر است هیپورات سدیم ۱ درصد آبکی را در مدت ۲ ساعت انکوباسیون در دمای ۳۵ºC را هیدرولیز کند. لوله سمت چپ واکنش مثبت را نشان میدهد.
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
لیستریا مونوسیتوژنس (L.monosytogenes)، در زیر کلنـیهای برداشته شده همولیز باریک مشاهده میشود.
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
آزمایش CAMP در لیستریا مونو-سیتوژنس، کشت این باکتری در حضور استافیلوکوکوس اورئوس باعث تشدید همولیز بتا شده که مانند نوک پیکان مشاهده میشود. باید دقت نمود هنگام کار با این ارگانیسم حتماً از دستکش استفاده شود.
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
کلنیهای آرکانوباکتریوم همولیتیکوم (A.haemolyticum) (عکس سمت چپ) و استرپتوکوکوس پیوژنس (عکس سمت راست)، کلنیهای آرکانوباکتریوم همولیتیکوم باریک (قطر ۰/۵- ۰/۱ میلیمتر) بعد از ۴۸ ساعت همولیز بتا ایجاد میکنند، میتوانند هنگامی که از کشت گلو جدا شوند با استرپتوکوکوسها اش...
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
کلنیهای رودوکوکـوس (Rhodococcus spp) بر روی آگار خوندار ۵ درصد تهیه شده از خون گوسفند، این باکتری در خانواده نوکاردیاسه طبقه بندی میشود. رودوکوکوس اکویی قبلاً در جنس کورینه باکتریوم یا مایکوباکتریوم طبقهبندی میشد. کلنی این باکتری پس از انکوباسیون طولانی مدت، پیگمان صورت...
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
A،B، ظاهر میکروسکوپی از رودوکوکوس (بزرگ نمایی ۱۲۵۰ برابر)، ارگانیسمهای جوانتر(کمتراز ۲۴ ساعت) نسبت به مسنها کشیده شدهتر هستند (A) و میتوانند حتی به شکل میلهای ظاهر شوند (B). پس از ۲۴ تا ۴۸ ساعت ظاهر ارگانیسمها به سمت کوکوسی شکل تغییر میکند. C. رنگآمیزی...
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
کلنیهای اورس کویا (Oerskovia spp) بر روی آگار خوندار ۵ درصد تهیه شده از خون گوسفند، این باکتریها متحرک گرم مثبت و رشتهای شکل هستند. این ارگانیسمها احتمالاً توسط خصوصیات میکروسکوپی، هیدرولیز اسکولین و تولید پیگمان زرد رنگ بر روی آگار خوندار شناسایی میشوند.
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
رنگآمیزی گرم از گونه نوکاردیا (Nocardia spp) (بزرگ نمایی ۱۲۵۰ برابر)، گونههای نوکاردیا باسیلهای گرم مثبت منشعب، رشتهای شکل و دانه دانه میباشند. تقریباً قطر حدود ۱ میلیمتر دارند و به شکل کوکسی و کوکو باسیل ظاهر میشوند.
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
فرم رشتهای، نوکاردیا استروئیدس (N.asteroides) کشت یافته بر روی تریپتی کاز سوی آگار
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
نوکاردیا استروئیدس، کلنیهای چین خرده وخشن از یک اکتینومایسس بیهوازی B. نوکاردیا استروئیدس (تصویر از نزدیک)
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
شناسایی جنس نوکاردیا با استفاده از آزمایشات بیوشیمیایی، گونههای نوکاردیا باسیلهای هوازی هستند که نیترات را به نیتریت احیاء کرده (لوله سمت چپ)، اوره را هیرولیز کرده (لوله مرکزی)، بر روی سطح محیط مایعی نظیر تیوگلیکولات رشد میکند (لوله سمت راست).
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
واکنشهای هیدرولیز آمینو اسید در نوکاردیا استروئیدس، واکنش تمام اسیدهای آمینه در پلیت منفی است. کازئین، تیروزین، گزانتین و هیپوگزانتین.
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
واکنشهای هیدرولیز اسیدهای آمینه در گونههای استرپتومایسس (Streptomyces spp) (بزرگنمایی ۱۰ برابر)، واکنش تمام اسیدهای آمینه در پلیت مثبت است، بر خلاف گونه نوکاردیا، گونه استرپتومایسس اسیدهای آمینه کازئین، تیروزین، گزانتین و هیپوگزانتین را هیدرولیز میکند. ظاهر کلنی&z...
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
استرپتومایسس آلبوس (S.albus) کشت یافته بر روی نوترینت آگار، کلنی با ظاهر رشتهای با حاشیه موج دار خفیف
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
کشت ده روزه استرپتومایسس آلبوس بر روی نوترینت آگار، کلنی با ظاهر نامنظم با حاشیه موجدار
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
کلنیهای گونه اکتینو مایسس (Actinomyces spp) ( بزرگنمایی 10 برابر)، کلنیهای شبیه به دندان آسیاب از اکتینو مایسس اسرائیلی که تحت شرایط بیهوازی مدت یک تا دو هفته رشد کرده است. این کلنیها با حاشیه نامنظم و به صورت انبوه رشد کردهاند.
باسیلهای گرم مثبت هوازی و گونههای اکتینومایسس
خصوصیات بیوشیمیایی از اکتینو مایسس اسرائیلی (A.israelii)، بیشـتر گونههای اکتینو مایسس مانند اکتینو مایسس اسرائیلی، نیترات را به نیتریت احیاء میکنند (لوله قرمز رنگ سمت راست) به علاوه اکتینو مایسس اسرائیلی اسکولین را هیدرولیز میکند (لوله سمت چپ) اما اوره را تجزیه نمیکند (لوله م...