خانواده انترو باکتریاسه

اشرشیا کلی (E.coli)، گرم منفی میله‌ای شکل

رنگ آمیزی گرم از پروتئوس میرابیلیس  (P.mirabilis) در نمونه ادرار به همراه لوکوسیت‌ها، باسیل‌های گرم منفی کوتاه، متوسط تا بلند که نشان دهنده ظاهر طبیعی باسیل‌های گرم منفی روده‌ای می‌باشد.

 کلنی سراشیا مارسیسنس (S.marcescens)، ظاهر محدب و دایره‌ای شکل کشت یافته بر روی تریپتیک سوی آگار  

اشرشیا کلی کشت یافته روی ائوزین متیلن بلو آگار، باسیل گرم منفی کولی فرم با جلای سبز فلزی که نشان دهنده‌ی تولید اسید از تخمیر لاکتوز می باشد.

انتروباکتر آئروژنز روی ائوزین متیلن بلو آگار (E.aerogenes)، باسیل گرم منفی کلی فرم با ظاهر کلنی‌های موکوئیدی و با مرکز قهوه‌ای یا سیاه که نشان دهنده‌ی تخمیر لاکتوز و تولید اسید می‌باشد.

کلبسیلا پنومونیه بر روی ائوزین متیلن بلو آگار، باسیل گرم منفی کلی فرم با ظاهر کلنی‌های موکوئیدی و با مرکز قهوه‌ای یا سیاه (کوچک‌تر از انتروباکتر) که نشان دهنده‌ی تخمیر لاکتوز و تولید اسید می‌باشد.

پروتئوس ولگاریس روی ائوزین متیلن بلو آگار (P.vulgaris)، باسیل گرم منفی کولی فرم با ظاهر کلنی‌های صورتی رنگ که لاکتوز را تخمیر نمی‌کنند و بعضی اسیدها را تولید می‌کنند.

کشت مخلوط از اشرشیا کلی و سودوموناس آئروژینوزا روی ائوزین متیلن بلو، کلنی‌های اشرشیا کلی با ظاهر سبزو جلای فلزی که نشان دهنده‌ی تخمیر لاکتوز است و کلنی‌های صورتی رنگ سودوموناس آئروژینوزا که عدم تخمیر لاکتوز را نشان می دهد.

کلبسیلا پنومونیه در رنگ آمیزی کپسول به روش آنتونی.

اشرشیا کلی کشت یافته بر روی محیط مک کانکی، باکتری‌های تخمیر کننده لاکتوز در این محیط کشت صورتی متمایل به رنگ قرمز هستند.

پلیت مک کانکی آگار، اشرشیا کلی تخمیر کنده لاکتوز (کلنی‌های صورتی پر رنگ) و سراشیا مارسیسنس لاکتوز را تخمیر نمی کند (کلنی‌های بی‌رنگ).

پلیت مک کانکی آگار، تلقیح داده شده توسط اشرشیا کلی و سالمونلا تیفی میوریوم به روش خطی یا نواری

پلیت مک کانکی آگار، تلقیح داده شده با شیگلا سونئی، تخمیر کننده تاخیری لاکتوز (کلنی های صورتی کم رنگ)، اشرشیا کلی تخمیرکننده لاکتوز و سراشیا مارسیسنس که لاکتوز را تخمیر نمی کند.

پلیت مک کانکی آگار، تلقیح مخلوط از اشرشیا کولی ( قرمز) و کلبسیلا پنومونیه (صورتی) توسط روش کشت خطی.

 پلیت مک کانکی آگار، تلقیح مخلوط از اشرشیا کلی ( قرمز) و انترو باکتر آئروژنز (صورتی) توسط روش کشت خطی.

پیگمان‌های قرمز سراشیا مارسیسنس، دانشجویان معمولاً پیگمان قرمز را با تخمیر لاکتوز اشتباه می‌کنند.

فلور نرمال مدفوع، باکتری‌های تخمیر کننده، مخلوط با شیگلا سونئی (S.sonnei) (غیر تخمیر کننده لاکتوز)

کلبسیلا پنومونیه، کلنی‌های موکوئیدی و تخمیر کننده لاکتوز که از خصوصیات بارز گونه‌های کلبسیلا و انتروباکتر است.

 فلور نرمال مدفوع مخلوط با سالمونلا، این سویه غیر معمول سالمونلا لاکتوز را تخمیر کرده است. کلنی‌ها توسط تولید H2S در محیط کشت هکتون تشخیص داده شده‌اند.

پروتئوس ولگاریس، عدم تخمیر لاکتوز با سوآرمینگ خفیف.

خانواده انتروباکتریاسه بر روی آگار خون دار ۵% تهیه شده از خون گوسفند، کلنی‌های غیر همولیتیک بزرگ، تیره و خاکستری رنگ مشاهده می‌شوند. همولیز در این خانواده متغیر است و معمولاً نمی‌توان آن‌را از روی یک جنس تشخیص داد.

خانواده انتروباکتریاسه روی آگار خون دار ۵٪ تهیه شده از خون گوسفند، مورگانلا مورگانئی (M.morganii)، سویه بتا همولیتیک، کلنی‌های بزرگ، خاکستری رنگ و مرطوب. همولیز در این خانواده متغیراست وکلنی تعدادی از گونه‌ها با هم شبیه هستند.

خانواده انتروباکتریاسه روی آگار خون دار ۵% تهیه شده از خون گوسفند، سراشیا مارسیسنس با پیگمان قرمز.

خانواده انتروباکتریاسه روی آگار خون دار ۵% تهیه شده از خون گوسفند، سوآرمینگ پروتئوس، این باکتری متحرک است و با سوآرمینگ بر سطح محیط جامد حرکت می‌کند. این باکتری دارای فلاژل است و به صورت یک لایه موج‌دار از خط تلقیح در سطح محیط منتشر می‌شود. این عکس حالت سوآرمینگ را از یک کلنی بر روی م...

سوآرمینگ پروتئوس بر روی آگار خون دار ۵% تهیه شده از خون گوسفند، سوآرمینگ پروتئوس در محیط با رطوبت کم حلقه‌های محدود سوآرمینگ حاصل از دو کلنی.

 کشت چهار جهتی (چهار خطی)، سویه db11 سراشیا مارسیسنس کشت یافته بر روی محیط تریپتی کاز سوی اگار.

کشت چهار جهتی ( چهار خطی)، اشرشیا کلی 25922 ATCC روی آگار خون دار ۵% تهیه شده از خون گوسفند.  

آزمایش دکربوکسیلاز و دی هیدروژناز آنزیم دکربوکسیلاز گروه کربوکسیل را از آمینواسیدهای لیزین و اورنیتین جدا می‌کند. آنزیم دی‌هیدرولاز گروه کربوکسیل را از آرژنین جدا می کند. لوله آزمایش سمت چپ پایه گلوکز بدون آمینو اسید است (لوله شاهد) که به آن باکتری تلقیح نشده است. به سایر لوله&zwnj...

در آگار TSI (سمت چپ) تخمیر سه قند گلوکز، لاکتوز و سوکروز، تولید H2S و گاز بررسی می‌شود. این محیط حاوی گلوکز به نسبت یک دهم لاکتوز و سوکروز، سیترات آمونیوم فریک و معرف فنل رد است. اگر ارگانیسم فقط گلوکز را تخمیر کند کل لوله شامل قسمت شیب دار و عمق اسیدی (زرد رنگ) می‌شود. اما باکتری پ...

واکنش های مختلف بر روی محیط شیب دار TSI، واکنش‌های ۱۰ لوله TSI به ترتیب از چپ به راست نوشته شده است. No. Slant Butt     H2S Gas formation 1 Acid Acid 0 0 2 Acid Acid 0 + 3 Alkaline Acid 0 + 4 Alkaline Acid 0 0 5 Alkaline Acid 0 0...

واکنش‌های مختلف بر روی محیط r/b1، واکنش‌های ۸ لوله r/b1  به ترتیب از چپ به راست نوشته شده است. No. Slant Butt H2S Gas formation PAD Lysine 1 Acid Acid 0 + 0 0 2 Alkaline Acid 0 0 0 0 3 Alkaline Acid 0 + 0 0 4 Alkaline Acid 0 0 0...

واکنش روی محیط شیب دار TSI ، لاکتوز و سوکروز تخمیر شده (مثل اشرشیا کلی). اسید / اسید

واکنش روی محیط شیب دار TSI، گلوکوز تخمیر شده (مثل مورگانلا مورگانئی) آلکالین / اسید

  واکنش روی محیط شیب دار TSI، گلو کز تخمیر شده و H2S تولید شده ( مثل پروتئوس میرابیلیس)  آلکالین / اسید + H2S  

 واکنش روی محیط شیب دار TSI ، لاکتوز و سوکروز تخمیر شده و H2S تولید شده مثل سیترو باکتر فروندی (C.freundii) اسید / اسید + H2S

واکنش روی محیط شیب دار TSI، تخمیر انجام نشده است (سودوموناس آئروژینوزا) آلکالین / آلکالین 

 انتروباکتریاسه روی محیط هکتون انتریک آگار اغلب گونه‌های انتروباکتریاسه، به‌جز انواع تخمیر کننده ی سریع لاکتوز (برخی گونه های اشرشیا، کلبسیلا، انتروباکتر و سیترو باکتر) روی محیط‌های مک کانکی آگار یا ائوزین متیلن بلو آگار بی رنگ هستند. بنابراین برای افتراق می...

گونه‌ی سالمونلا و برخی دیگر از جنس‌های انترو باکتریاسه روی هکتون انتریک آگار اگر ارگانیسم لاکتوز یا سالیسین را تخمیر نکند، کلنی‌ها به رنگ سبز (رنگ محیط کشت) مشاهده می شوند. اگر میکرو ارگانیسم H2S تولید کند که یکی از خصوصیات مهم انترو باکتریاسه است، در ابتدا مرکز کلنی‌ها و...

شناسایی انتروباکتریاسه با استفاده از آزمایش سریع نقطه‌ای تست‌های نقطه‌ای به‌منظور شناسایی سریع بسیاری از باکتری‌ها متداول می‌باشند. برای این روش از یک فیلتر کاغذی یا یک دیسک کاغذی استفاده می‌شود. برای انجام این روش چند کلنی از باکتری را توسط یک اپلیکاتور چوبی استر...

آزمایش اکسیداز نقطه‌ای برخی از باکتری‌ها که دارای سیتوکروم اکسیداز یا ایندوفنل اکسیداز هستند. الکترون را از ترکیبات دهنده (NADH) به گیرنده‌های الکترون (O2) منتقل می کنند. سوبسترای پارا فنیل دی آمین دی هیدرو کلراید، به‌عنوان پذیرنده ی مصنوعی الکترون برای آنزیم آکسید...

آزمایش ایندول نقطه‌ای ایندول یکی از فرآورده‌های حاصل از تجزیه آمینو اسید تریپتوفان است. ایندول که در محیط غنی از تریپتوفان تولید می‌شود، می‌تواند با آلدئیدهای خاصی ترکیب شود و ترکیب رنگی ایجاد نماید. برای انجام این تست، فیلتر کاغذی با ترکیبی مانند پارادی متیل آمینو بنزآلدئید (م...

آزمایش متیل رد-وژپروسکوئر(MR-VP) هر دو تست با استفاده از یک نوع محیط کشت در دو لوله آزمایش جداگانه انجام می‌شوند. تست متیل رد برای تعیین pH محصولات نهایی حاصل از تخمیر گلوکز به‌کار می‌رود. بعضی از انتروباکتریاسه هنگام تبدیل گلوکز به اسید پیروویک محصولات نهایی اسیدی تولید می‌کنند...

آزمایش اُ نیتروفنیل بتا د گالاکتو-پیرانوزید (ONPG) آنزیم بتا گالاکتوزیداز تخمیر لاکتوز را کاتالیز می‌کند. باکتری‌هایی که لاکتوز را به ‌طور سریع تخمیر می کنند، دارای آنزیم پرمه آزی هستند که موجب تسریع واکنش و ایجاد کلنی صورتی رنگ در سطح مک کانکی آگار می شود. تخمیر آهسته&...

 آزمایش مصرف سیترات بعضی از باکتری‌های متعلق به انتروباکتریاسه می‌توانند سیترات را به‌عنوان تنها منبع کربن مصرف کنند. برای انجام تست، یک کلنی باکتری در سطح شیب دار محیط سیترات اگار تلقیح می‌شود. محیط سیترات به مدت ۲۴ ساعت در دمای ۳۵ درجه سانتی‌گراد انکوبه می‌گردد...

 آزمایش فنیل آلانین دآمیناز (PAD) بعضی از میکروارگانیسم‌ها می‌توانند یک گروه آمین را از آمینو اسید فنیل آلانین حذف کنند و فنیل پیروویک اسید ایجاد نمایند. برای بررسی نتیجه آزمایش، چند قطره کلراید فریک ۱۰% به محیط فنیل آلانین که میکروارگانیسم در آن رشد یافته است اضافه می شود. ای...

آزمایش تجزیه اوره، میکروارگانیسم‌هایی که دارای آنزیم اوره آز هستند، می توانند اوره را به آمونیوم و CO2 تجزیه کنند. با قلیایی شدن محیط کشت، رنگ معرف فنل رد صورتی پر رنگ می شود که نشان دهنده مثبت بودن آزمایش است. در لوله سمت چپ پروتئوس میرابیلیس کشت یافته است که طی ۲ تا ۴ ساعت اور...

آزمایش فنیل آلانین د آمیناز و آزمایش اُوره آزمایش هردو تست در چهار گونه ازانتروبا-کتریاسه مثبت است. پروتئوس میرابیلیس، پروتئوس ولگاریس، مورگانلا مورگانی و پروویدنسیا رتگری. اگر ارگانیسم بر روی آگار خون دار تولید سوآرمینگ کند، یکی از گونه‌های پروتئوس است. یک تست نقطه‌ای ایندول می&t...

انواع واکنش‌ها در محیط کشت سیترات/ رامنوز در قسمت فوقانی این محیط کشت (شرایط هوازی) توانایی مصرف سیترات بررسی می‌شود و در قسمت پایینی (شرایط بی‌هوازی) تخمیر رامنوز ارزیابی می‌شود. تصویر موجود چهار حالت این محیط کشت را نشان می دهد.  No. Citrate Rhamnose...

واکنش‌های مخصوص گونه سالمونلا به جز سالمونلا تیفی TSI  r/b1  r/b2 CIT/RHAM Alk/acid Alk/acid Ornithine + + / + H2S+ H2S+ Motile     Lysine + Indole 0     PAD 0    

 واکنش‌های مخصوص سالمونلا تیفی TSI  r/b1  r/b2 CIT/RHAM Alk/acid Alk/acid Ornithine 0 0 / 0 Slight  Slight  Motile   H2S+ H2S +       Lysine + Indole 0     PAD 0    

واکنش‌های مخصوص یرسینیا انتروکولیتیکا TSI  r/b1  r/b2 CIT/RHAM Alk/acid Alk/acid Ornithine + 0 / + H2S 0 Lysine 0 Non motile     H2S 0 Indole +     PAD 0    

واکنش های مخصوص پروتئوس ولگاریس TSI  r/b1  r/b2 CIT/RHAM acid/acid Alk/acid Ornithine 0 + / 0 H2S + H2S + motile     PAD + Indole +     Lysine 0    

تشخیص اشرشیا کلی با استفاده از نوار MICRO-ID  این نوارها حاوی ۱۵ تست بیوشیمیایی برای تشخیص سریع (۴ ساعته) انتروباکتریاسه هستند. در این آزمایش از سوسپانسیون غلیظ باکتری استفاده می‌شود. این تست‌ها عبارتند از وژپرسکوئر(VP) نیترات (N) فنیل آلانین دآمیناز (PD) H2S  ایندول(I)...

تطبیق مورفولوژی کلنی با مشخصات بیوشیمیایی، یکی از مراحل مهم تشخیص نهایی یک سویه، تطبیق واکنش بیوشیمیایی با مورفولوژی کلنی و واکنش‌هایی است که در اولین کشت پلیت انجام می‌شود. در این مثال، کلنی‌های گونه‌ای از سالمونلا روی محیط کشت هکتون انتریک آگار H2S تولید کرده است و همچنین تول...