رنگ آمیزی كانیون (زیل‌نلسون اصلاح شده)
تهیه و تنظیم: دکتر محمد قهری
معرفی آزمایش کانیون
برای رنگ‌آمیزی باكتری‌های اسید فست مانند مایكوباكتریوم‌ها و نیز باكتری‌های اسید فست نسبی یا اسید فست ضعیف مانند نوكاردیاها بکار می‌رود.
کاربرد بالینی آزمایش کانیون
در مواردی که تشخیص نوکاردیوز مطرح باشد نمونه‌های خلط، چرک و اکسودا با این روش رنگ‌آمیزی می‌گردد.
روش تهیه محلول‌های رنگ‌آمیزی
الف- تهیه رنگ کربول فوشین
فوشین قلیائی: 4 گرم
فنل حل شده: 8 میلی لیتر
اتانول 95%: 20 میلی لیتر
با آب مقطر حجم را به 100 میلی لیتر برسانید.
ب- محلول بی رنگ کننده
اسید سولفوریک غلیظ: نیم میلی لیتر
آب مقطر: 99/5 میلی لیتر
اسید را به آب افزوده و خوب بهم بزنید.
ج- رنگ زمینه آبی متیلن
پودر آبی متیلن: 4 گرم
آب مقطر: 400 میلی لیتر
به وسیله تکان دادن ظرف محتوی رنگ، آن را در آب بطور کامل حل کنید.
روش رنگ آمیزی کانیون
- رنگ كانیون كربول فوشین را روی لام بریزید و 5 دقیقه صبر نمائید.
- شستشوی كامل با آب
- لام ها را در محلول اسید سولفوریک یک درصد قرار داده تا کاملا رنگ گسترش‌ها زایل شود.
- شستشوی كامل با آب
- رنگ متیلن بلو به مدت 3 دقیقه روی لام بماند.
- شستشوی كامل با آب
- لام را خشک كرده و با عدسی روغنی میكروسكوپ مشاهده كنید.
توضیح:
استفاده از رنگ كربول فوشین (carbolfuchsin) در این رنگ آمیزی به دلیل اینكه دارای غلظت بیشتری از فنل و فوشین بازیک است نیازی به حرارت دادن (مانند زیل نلسون كلاسیک) ندارد.
اسیدكلریدریك 3% كه در محلول اسیدالكل وجود دارد برای مایكوباكتریوم‌ها مناسب است. اگر هدف بررسی و مشاهده نوكاردیاها باشد بهتر است در تركیب اسید الكل به عوض اسیدكلریدریک از اسید سولفوریک 1% استفاده شود.
قارچ شناسی پزشکی جامع. تالیف دکتر فریده زینی، دکتر امیر سید علی مهبد، دکتر مسعود امامی. انتشارات دانشگاه تهران. 1383
