تکنیک موسیکارمین مایر برای رنگآمیزی قارچ
تکنیک رنگآمیزی موسیکارمین مایر [۱] موسیکارمین یک روش آزمایشگاهی است که برای اهداف مختلف استفاده میشود. در میکروبیولوژی، این رنگ به شناسایی انواع میکروارگانیسمها کمک میکند. به طور کلی این روش محدود به میکروارگانیسمهایی با دیواره سلولی است که حداقل تا حدی از یک جزء پلی ساکارید تشکیل شده است. یکی از ارگانیسمهایی که با استفاده از این روش رنگ آمیزی شناسایی میشود کریپتوکوکوس نئوفورمانس[۲] است.
در این مطلب قصد داریم به بررسی این روش رنگآمیزی، کاربرد و نحوه انجام آن بپردازیم. پس در ادامه با ما همراه باشید.
رنگ موسیکارمین مایر
رنگ موسیکارمین مایر برای رنگ آمیزی موسینهای بافتی با منشاء اپیتلیال در نظر گرفته شده است. معرفهای رنگ آمیزی موسیکارمین برای استفاده تشخیصی در شرایط آزمایشگاهی مناسب هستند. اسید-موکوپلی ساکاریدهای بافت ممکن است با تکنیکهای مختلفی نشان داده شوند. روش موسیکارمین مایر یک کنتراست عالی بین موسین و سایر اجزای سلولی ایجاد میکند. اعتقاد بر این است که آلومینیوم موجود در فرمولاسیون این رنگ، یک کمپلکس کلات با موسین تشکیل میدهد که کارمین به آن میچسبد.
البته باید توجه داشته باشید که این رنگ ویژگی موسینهای با منشاء اپیتلیالی را نشان میدهد. اما موسینهای با منشاء فیبروبلاستیک ممکن است به صورت خیلی ضعیف رنگامیزی شوند.
مواد و محلولهای مورد استفاده
برای استفاده از این تکنیک رنگ آمیزی، به مواد و محلولهای ذکر شده در جدول ۱ نیاز است.
نام فارسی ماده |
نام انگلیسی ماده |
مقدار |
موسیکارمین |
Mucicarmine |
۱g |
کلرید آلومینیوم |
Aluminum chloride |
۰٫۵g |
آب مقطر |
Distilled water |
۳mL |
اتانول ۵۰% |
Ethanol, 50% |
۱۰۰mL |
- برای آماده سازی محلول به صورت زیر عمل کنید:
- کارمین، کلرید آلومینیوم و آب را با هم ترکیب کنید.
- محلول را حرارت دهید تا رنگ آن به قرمز تیره تغییر کند.
- اجازه دهید محلول سرد شود و سپس اتانول ۵۰ درصد را اضافه کنید.
- توصیه میشود زمان استفاده از محلول حداکثر ۱۰ روز پس از تهیه آن باشد.
چه نمونه بافتی برای تکنیک موسیکارمین مایر مناسب است؟
در وهله اول، بافتهای تثبیت شده با الکل توصیه میشود. اما سکشنهای پارافینی ۵ میکرونی از بافت که با بافر فرمالین خنثی تثبیت شده اند نیز مناسب هستند.
تکنیک موسیکارمین مایر برای رنگآمیزی قارچ
- هیدراسیون را با استفاده از زایلن و اتانول انجام دهید.
- سپس با استفاده از همالوم بلو رنگ امیزی هسته را انجام دهید.
- لام را با اتانول ۷۰ درصد شستشو دهید.
- به مدت ۱۰ الی۱۵ دقیقه در موسیکارمین مایر رقیق شده با اتانول ۷۰ درصد (۱:۱۰) را روی لام اعمال کنید.
- سپس با اتانول ۹۵ درصد خوب بشویید.
- در نهایت از زایلین استفاده کرده و لامل را روی لام قرار دهید.
نتایج مورد انتظار
- هسته ها : آبی
- موسین : قرمز
- زمینه : صورتی
سخن پایانی
رنگ آمیزی قارچ با موسیکارمین مایر برای بررسی موسین کاربرد دارد. موسین، مایعی است که توسط سلولهای اپیتلیال مختلف ترشح میشود. سلولهای اپیتلیال در حین کارسینوم یا در برخی التهابات به مقدار زیاد موسین تولید میکنند.
رنگ موسیکارمین مایر گونههای کریپتوکوک و رینوسپوریدیوم را شناسایی می کند. در این تکنیک، قارچ به رنگ قرمز ، هستهها سیاه یا ابی دیده میشود.
واژه نامه
Cryptococcus neoformans | [۲] | mayers-mucicarmine | [۱] |